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  • SPARKeasy 酵母基因组DNA快速提取试剂盒 (含蛋白酶K,不含lytic Enzyme)
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  • SPARKeasy 酵母基因组DNA快速提取试剂盒 (含蛋白酶K,不含lytic Enzyme)
    Lytic Enzyme、蛋白酶K溶液于-20℃保存,其它组分室温(15-25℃)保存

    基本信息

    货号 规格 价格(元) 库存
    AA0301-A 50次 550 现货

    产品概述



    本试剂盒采用DNA吸附柱和独有的溶液系统,适合于从多种来源的酵母培养物中快速简单地提取基因组DNA,可在3 h内完成单个样本或多个样本的抽提工作。约3 mL处于指数生长期的酵母培养液一般一次抽提可纯化出10-15 μg高质量的基因组DNA。获得基因组DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。酵母细胞经Lytic Enzyme处理去除细胞壁后,独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗、离心的步骤,进一步将蛋白、多糖、多酚以及细胞代谢物等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。





    注意事项


    请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项


    ◇ 所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。


    ◇ 开始实验前根据需要将水浴预热到37℃或者70℃备用。


    ◇ 结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。


    ◇ 结合液CB和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。


    ◇ Sorbitol buffer(1 M 山梨醇,0.1 M Na2EDTA,14 mM β-巯基乙醇)配制方法:在600 mL去离子水里面溶解182.2 g山梨醇,加入200 mL 0.5 M Na2EDTA(pH 8.0),不需要调节PH值,定容到1 L,4 ℃保存。临用前吸取出要使用的量加0.2% β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14 M),恢复到室温,混匀备用。


    ◇ 菌体浓度检测一般OD 600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1-2×107 cells/mL,由于菌种和分光光度度计不同,即使同样细胞数量OD值变化也很大,以上仅供参考。


    ◇ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。


    ◇ 第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!


    ◇ 关于平衡液的使用:取一个新的硅胶膜吸附柱装在收集管中,吸取100 μL的平衡液至吸附柱中。12,000 rpm(13,400×g)离心1 min,倒掉收集管中废液,将吸附柱重新放回收集管。此时平衡液预处理离心柱完毕。




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