MTT、CCK-8试剂盒,我该pick哪一种?

2019-12-30

MTT、CCK-8试剂盒是进行细胞增殖和细胞毒性检测的常用试剂盒,在进行实验时应该如何从两种试剂盒中进行选择呢?


跟“星博士”一起看看这两种试剂盒的具体介绍吧!








原理介绍

MTT试剂盒中含有MTT(化学名:3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐),外源性MTT能够被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原为深紫色结晶甲瓒,该产物不溶于水,会沉积在细胞中,而死细胞无此功能。加入特定溶剂后,甲瓒可以被完全溶解,然后通过酶标仪测定490 nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,对应的吸光度越高;细胞毒性越大,对应的光度越低。


CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂盒广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测。本试剂中含有WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),是一种类似于MTT的化合物,它在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在条件下,可被线粒体内的脱氢酶还原为橙色甲瓒产物Formazan,该产物具有高度水溶性,生成的Formazan数量与活细胞数量成正比。检测速度快且灵敏度高于任何其它四唑盐,如MTT、XTT或MTS。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。




优势介绍

MTT配制过程需避光、无菌,且MTT比较难溶需振荡器混匀配置过程麻烦。MTT试剂盒中是已配制好的组分,实验过程中直接添加即可。与CCK8试剂盒相比,性价比更高。

序号

组分

500T

CT0002

1

MTT溶液

5 mL

2

Formazan溶解液

60 mL

CCK-8试剂盒,不需配制,无需换液,步骤便捷,灵敏度高。同MTT相比对细胞无明显毒性,一般状况下对细胞形态没有明显的改变,因此加入CCK-8溶液显色后,可选择不同时间点反复用酶标仪读板,找到实验最佳测定时间。

序号

组分

100T

CT0001-A

500T

CT0001-B

1

CCK-8溶液

1 mL

5 mL

注意事项:

1试剂使用前,注意检查是否已完全解冻,必须在完全溶解并混匀后使用。

2使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意液体蒸发。96孔板外围一圈最容易蒸发,可以弃用外围一圈,改加PBS、水或培养液。也可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以减缓蒸发。

3最终进行细胞存活率等计算时,需要扣除本底的吸光度,因此要注意进行空白孔的设置。

4操作时注意不要产生气泡在最终读板时注意检查孔内是否有气泡。气泡会影响测定结果,可通过轻敲混匀的方式进行消除。

那么,到底应该如何进行选择呢?敲黑板,划重点:

1、如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求不高,建议选择性价比更高的MTT试剂盒;

2、如果要求较高的检测灵敏度,建议选择灵敏度高的CCK-8试剂盒

3、进行大批量样品检测建议选择CCK-8试剂盒,因为CCK-8试剂盒操作更便捷;

4、如果细胞毒性要求比较严格,建议选择CCK-8试剂盒,因为CCK-8试剂盒对细胞无明显毒性一般况下对细胞形态没有明显的改变


想要了解更多产品,请关注思科捷网www.sparkjade.com。我们将持续加大研发投入,丰富产品种类,苛求产品质量,不断为广大科研用户提供更加可靠的产品和更优质的服务,真正做到思以科,捷所成!






  • 在线客服
  • 在线留言
  • 联系电话
    400-6947-688
  • 招商热线
    185 6251 5130
  • Copyright © 2019 山东思科捷生物技术有限公司  All right reserved 浩赛官网 科学仪器     备案号 鲁ICP备2022004154号-3