做植物实验的小伙伴，谁还没被RNA提取折磨过？

多糖多酚样本一提就降解、gDNA残留跑胶全是拖尾、产量低到怀疑人生……这些“名场面”是不是历历在目？今天直接把AC0305植物RNA提取试剂盒的完整操作流程给大家整理好了，照着做就行，新手也能零翻车~

AC0305的优势点

1.思科捷AC0305基于SPARKeasy无苯酚、氯仿RNA快速提取技术，全程不用接触有毒试剂。

2.无需全程冰上操作，实验环境更安全更友好。

3.双柱设计---基因组DNA清除柱+RNA吸附柱，用物理方式清除gDNA，而不是靠DNase消化，纯化效果更充分，时间更快。

4.适配范围也相当能打：普通植物不在话下，小麦、棉花叶片轻松搞定，就连高多糖多酚的复杂样本比如种子、果实也能稳定提取。

AC0305操作流程及注意事项
照着做就对了

1、实验前准备（成败在此一举）

① 全程使用无RNase耗材，台面提前做RNase灭活处理---这是防止RNA降解的第一道防线。

② 检查试剂：去蛋白液、漂洗液按瓶身标注，补加对应量无水乙醇并做好标记。很多新手翻车就翻在忘了这一步。

③ 植物样本：新鲜组织尽快用液氮充分研磨，样本量控制在试剂盒推荐范围，千万别贪多，第一次做建议做样本量梯度筛选最佳样本量。

2、正式提取五步走

① 裂解：取研磨好的植物样本，加入裂解液，充分震荡混匀，保证组织完全裂解。

② 去除gDNA：将裂解混合液转移至基因组DNA清除柱，离心后弃掉柱子，收集下方滤液（这一步千万别弃错了）。

③ 结合RNA：向滤液中加入对应试剂混匀，转移至RNA吸附柱，离心让RNA牢牢结合在硅胶膜上。

④ 去蛋白+漂洗：依次加入去蛋白液、漂洗液，分步离心洗涤。

小技巧：每步漂洗充分，能大幅提升RNA纯度。

⑤ 干燥+洗脱：空管离心彻底挥发残留乙醇，然后向吸附柱膜中央滴加无RNase水，室温静置后离心收集。

3、收尾保存

用分光光度计测浓度与OD260/280；OD260/230，正常比值区间结果合格。短期-20℃存放，长期分装后-80℃冷冻，避免反复冻融。

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