一、蛋白质印迹（Western Blot, WB）

    又称为免疫印迹（Immunoblot），是利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）将样品中分子量大小不同的蛋白分开，然后通过电转移的方法将凝胶中的蛋白转移到固相膜上，再利用抗原、抗体的特异性结合反应，特殊的抗体标记技术以及相应的检测方法，进而对目的蛋白进行定性、相对定量检测的技术。

二、Western Blot用途

检测目标蛋白有无、大小
检测处理后目标蛋白的表达量变化
检测目标蛋白在不同的细胞或组织中的表达量差异

三、Western Blot实验流程

四、样本制备

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Western Blot技术讲解——样本制备篇

五、电泳分离

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Western Blot技术讲解---电泳分离篇

六、转膜

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Western Blot技术讲解---转膜篇

七、封闭

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Western Blot技术讲解——封闭篇

八、抗体孵育

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Western Blot技术讲解——抗体孵育篇

九、检测

原理和方法：

WB常用的检测方法主要有：化学发光检测、底物显色检测和荧光检测（Odyssey系统），实验室最常用的则是化学发光检测。

1、化学发光原理：

在HRP的催化下，Luminol与H₂O₂反应生成过氧化物，过氧化物不稳定随即分解，形成一种能发光的电子激发中间体，当中间体由激发态返回至基态，就会产生荧光。

2、三种不同检测方法的优缺点：

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产品特点：

灵敏度高；信号强；背景低；

可检测ng甚至pg级的低丰度的蛋白；

可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。

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