SPARKclassic 质粒中量提取试剂盒
RNase A、内毒素清除剂于-20℃保存,其它组分室温(15-25℃)保存

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AD0201

SPARKclassic 质粒中量提取试剂盒

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本试剂盒用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,1 h内可完成单个样本的抽提工作,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在1.5 mL小离心管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚氯仿抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10 kb甚至100 kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。可选择任意小体积溶解质粒,浓度可高达5 μg/μL。超螺旋比例可高达95%,无内毒素,转染效果好。

推荐使用量及产量:高拷贝质粒推荐使用量50-70 mL,得率可多达150-600 µg左右;低拷贝质粒或大于10 kb的大质粒,应适当增加菌体量,同时按比例增加溶液P1、溶液P2、溶液PⅢ的用量,其它步骤相同。


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