SPARKeasy 粪便基因组DNA快速提取试剂盒 (含蛋白酶K)
蛋白酶K溶液于-20℃保存;其它组分室温(15-25℃)保存

基本信息

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AA0701-B 50次 930 现货

产品概述

常规的DNA纯化方式并不能有效地去除粪便中存在的大量抑制因子而导致下游实验的失败,如PCR不能扩增出所需片段。该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统,能有效去除动物粪便中各种影响下游实验(如PCR)的抑制因子,并能高效地回收粪便中的基因组DNA,并且操作简单方便,可在30 min内完成单个或多个样品的提取。

动物粪便样品经特殊缓冲液ASL重悬后,70 ℃处理5分钟裂解细菌;离心去除不溶解的杂质,蛋白酶K消化进一步去除蛋白和杂质;然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗、离心的步骤,进一步将蛋白、多糖、多酚以及细胞代谢物等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。


注意事项

请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项

◇ 所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。

◇ 结合液CB、缓冲液ASL或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

◇ 结合液CB和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。

◇ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。

◇ PCR可能被过量的DNA(一般大于1 μg)抑制,使用最小用量的洗脱DNA(适当稀释)反而可以得到更好的扩增。一般加入的洗脱DNA体积不要超过总PCR反应体积的10%。我们建议在PCR反应体系中加入终浓度0.1 μg/μL的BSA(牛血清白蛋白)有助于得到最佳扩增效果。

◇ 第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!

◇ 关于平衡液的使用:取一个新的硅胶膜吸附柱装在收集管中,吸取100 μL的平衡液至柱中。12,000 rpm(13,400×g)离心1 min,倒掉收集管中废液,将吸附柱重新放回收集管。此时平衡液预处理柱完毕。平衡液在保存过程中可能有沉淀生成,请加热至37℃使沉淀完全消失。

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